Γιατί η E.coli χρησιμοποιείται για κλωνοποίηση γονιδίων

Ένας ευέλικτος μικροοργανισμός με απίστευτο δυναμικό

Ο μικροοργανισμός Escherichia coli έχει μακρύ ιστορικό χρήσης στον τομέα της βιοτεχνολογίας και εξακολουθεί να είναι ο μικροοργανισμός επιλογής για τα περισσότερα πειράματα γονιδιακής κλωνοποίησης. Αν και η E. coli είναι γνωστή στο γενικό πληθυσμό για τη μολυσματική φύση ενός συγκεκριμένου στελέχους (0157: H7) λίγοι άνθρωποι γνωρίζουν πόσο ευέλικτο και χρήσιμο E. coli είναι στη γενετική έρευνα. Υπάρχουν αρκετοί λόγοι για τους οποίους η E. coli έγινε τόσο ευρέως χρησιμοποιημένη και εξακολουθεί να είναι ένας κοινός ξενιστής για το ανασυνδυασμένο DNA.

  • 01 Γενετική απλότητα

    Τα βακτήρια αποτελούν χρήσιμα εργαλεία για τη γενετική έρευνα λόγω του σχετικά μικρού μεγέθους γονιδιώματός τους σε σύγκριση με τους ευκαρυώτες. Τα κύτταρα Ε. Coli έχουν μόνο περίπου 4.400 γονίδια ενώ το έργο ανθρώπινου γονιδιώματος έχει προσδιορίσει ότι οι άνθρωποι περιέχουν περίπου 30.000 γονίδια. Επίσης, τα βακτήρια, συμπεριλαμβανομένου του Ε. Coli , ζουν ολόκληρη τη ζωή τους σε μια απλοειδή κατάσταση (που έχει ένα ενιαίο σύνολο μη συζευγμένων χρωμοσωμάτων). Ως αποτέλεσμα, δεν υπάρχει δεύτερη σειρά χρωμοσωμάτων που να καλύπτουν τις επιδράσεις των μεταλλάξεων κατά τη διάρκεια πειραμάτων μηχανικής πρωτεΐνης .
  • 02 Ρυθμός ανάπτυξης

    Τα βακτήρια συνήθως αναπτύσσονται πολύ ταχύτερα από τους πιο πολύπλοκους οργανισμούς. Το Ε. Coli αναπτύσσεται ταχέως με ρυθμό μιας γενιάς ανά είκοσι λεπτά υπό τυπικές συνθήκες ανάπτυξης. Αυτό επιτρέπει την προετοιμασία των καλλιεργειών log-phase (μεσαίας έως μέγιστης πυκνότητας) κατά τη διάρκεια της νύχτας και τα γενετικά πειραματικά αποτελέσματα σε απλές ώρες αντί για αρκετές ημέρες, μήνες ή χρόνια. Η ταχύτερη ανάπτυξη σημαίνει επίσης καλύτερους ρυθμούς παραγωγής όταν οι καλλιέργειες χρησιμοποιούνται σε κλιμακωτές διαδικασίες ζύμωσης .

  • 03 Ασφάλεια

    Το Ε. Coli απαντάται φυσικά στις εντερικές οδούς ανθρώπων και ζώων, όπου βοηθά στην παροχή θρεπτικών συστατικών (βιταμίνες Κ και Β12) στον ξενιστή του. Υπάρχουν πολλά διαφορετικά στελέχη του Ε. Coli που μπορεί να παράγουν τοξίνες ή να προκαλέσουν ποικίλα επίπεδα μόλυνσης, αν καταποθούν ή επιτρέψουν να εισβάλουν σε άλλα μέρη του σώματος. Παρά την κακή φήμη ενός ιδιαίτερα τοξικού στελέχους (Ο157: Η7), τα Ε. Coli είναι γενικά σχετικά αβλαβή όταν αντιμετωπίζονται με λογική υγιεινή.

  • 04 Το γονιδίωμα του E. Coli είναι καλά κατανοητό

    Το γονιδίωμα Ε. Coli ήταν το πρώτο που αναλύθηκε πλήρως (το 1997). Ως αποτέλεσμα, το Ε. Coli είναι ο πλέον μελετημένος μικροοργανισμός. Η προηγμένη γνώση των μηχανισμών έκφρασης πρωτεϊνών της καθιστά απλούστερη τη χρήση της σε πειράματα όπου η έκφραση ξένων πρωτεϊνών και η επιλογή ανασυνδυασμένων ουσιών είναι απαραίτητη.

  • 05 Ικανότητα να φιλοξενήσει ξένο DNA

    Οι περισσότερες τεχνικές κλωνοποίησης γονιδίων αναπτύχθηκαν χρησιμοποιώντας αυτό το βακτήριο και είναι ακόμα πιο επιτυχημένες ή αποτελεσματικές σε Ε. Coli από ότι σε άλλους μικροοργανισμούς. Ως αποτέλεσμα, η παρασκευή των κατάλληλων κυττάρων (κύτταρα που θα πάρουν το ξένο DNA) δεν είναι περίπλοκη. Οι μετασχηματισμοί με άλλους μικροοργανισμούς είναι συχνά λιγότερο επιτυχείς.

  • 06 E Coli είναι εύκολο να φροντίσει για

    Επειδή αυξάνεται τόσο καλά στο ανθρώπινο έντερο, το E. coli βρίσκει εύκολο να αναπτυχθεί όπου οι άνθρωποι μπορούν να δουλέψουν. Για παράδειγμα:

    • Είναι πιο άνετα στη θερμοκρασία του σώματος. Ενώ οι 98,6 μοίρες μπορεί να είναι λίγο ζεστό για τους περισσότερους ανθρώπους, είναι εύκολο να διατηρηθεί αυτή η θερμοκρασία στο εργαστήριο.
    • Το E. coli ζει στο ανθρώπινο έντερο, πράγμα που σημαίνει ότι δεν είναι περίεργη για το φαγητό του. Ουσιαστικά, είναι στην ευχάριστη θέση να καταναλώνει οποιοδήποτε είδος προγαμμένο φαγητό.
    • Μπορεί να αναπτυχθεί τόσο αερόβια όσο και αναερόβια. Έτσι, μπορεί να πολλαπλασιαστεί στο έντερο ενός ανθρώπου ή ενός ζώου, αλλά είναι εξίσου ευτυχής σε ένα πιάτο ή φιάλη petri.
  • Πώς η E. Coli κάνει μια διαφορά

    Το E. Coli είναι ένα απίστευτα ευπροσάρμοστο εργαλείο για γενετικούς μηχανικούς. ως αποτέλεσμα, έχει ήδη παράγει ένα εκπληκτικό φάσμα φαρμάκων και τεχνολογιών. Έχει ακόμη, σύμφωνα με την Λαϊκή Μηχανική, να γίνει το πρώτο πρωτότυπο για έναν βιο-υπολογιστή: "Σε έναν τροποποιημένο μεταγραφέα Ε. Coli", που αναπτύχθηκε από τους ερευνητές του Πανεπιστημίου του Stanford τον περασμένο Μάρτιο, ένα κλώνο DNA βρίσκεται για το σύρμα και τα ένζυμα για τα ηλεκτρόνια. Πιθανώς, αυτό είναι ένα βήμα προς την οικοδόμηση υπολογιστών εργασίας μέσα στα ζωντανά κύτταρα που θα μπορούσαν να προγραμματιστούν για τον έλεγχο της γονιδιακής έκφρασης σε έναν οργανισμό. Ένα τέτοιο κατόρθωμα θα μπορούσε να επιτευχθεί μόνο με τη χρήση ενός οργανισμού που είναι καλά κατανοητός, εύκολος στην εργασία και ικανός να αναπαραχθεί γρήγορα.